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転写制御解析キャンペーン

定量PCR関連試薬

逆転写 - 定量PCR

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
インターカレーター法
GoTaq® 2-Step RT-qPCR System 50RT/200qPCR反応分 A6010 62,000 24,800
GoTaq® 1-Step RT-qPCR System 200回分 A6020 75,000 30,000
プローブ法
GoTaq® Probe 2-Step RT-qPCR System 50RT/200qPCR反応分 A6110 38,000 15,200
GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System 200回分 A6120 61,000 24,400

逆転写

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
GoScript™ Reverse Transcription System 50回分 A5000 43,000 17,200
100回分 A5001 82,000 32,800

定量PCR

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
インターカレーター法
GoTaq® qPCR Master Mix 200回分 A6001 51,000 20,400
1,000回分 A6002 211,000 84,400
プローブ法
GoTaq® Probe qPCR Master Mix 200 x 20µl反応分 A6101 19,000 7,600
1,000 x 20µl反応分 A6102 79,000 31,600

RNA精製キット

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
動物培養細胞のRNA精製
Reliaprep™ RNA Cell Miniprep System 50回分 Z6011 32,000 22,400
250回分 Z6012 145,000 101,500
組織のRNA精製
Reliaprep™ RNA Tissue Miniprep System 50回分 Z6111 34,000 23,800
250回分 Z6112 152,000 106,400
細胞・組織のmiRNA精製
Reliaprep™ miRNA Cell and Tissue Miniprep System 50回分 Z6211 45,000 31,500
250回分 Z6212 200,000 140,000

RNase阻害剤

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
RNasin® Plus RNase Inhibitor 2,500u N2611 23,000 11,500
10,000u N2615 49,000 24,500

レポーターアッセイ関連試薬

NanoLuc® システム

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
お得セット(デュアルレポーター検出試薬+ 内部標準ベクター)
Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pNL1.1.TK Bundle 1セット N1521 80,000 40,000
Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pNL1.1.PGK Bundle 1セット N1531 80,000 40,000
Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pGL4.54[luc2/TK] Bundle 1セット N1541 80,000 40,000
Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay/pGL4.53[luc2/PGK] Bundle 1セット N1551 80,000 40,000
NanoLuc®テストベクター
pNL1.1[Nluc] Vector 20ug  N1001 73,000 36,500
pNL1.2[NlucP] Vector 20ug  N1011 73,000 36,500
pNL1.3[secNluc] Vector 20ug  N1021 73,000 36,500
デュアルレポーター検出試薬
Nano-Glo® Dual-Luciferase® Reporter Assay System 10ml N1610 39,000 27,300
100ml N1620 290,000 203,000

Dual-Luciferase® システム

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
デュアルレポーター検出試薬:発光値が高く、初期検討にお勧め
Dual-Luciferase® Reporter Assay System 100回分 E1910 31,000 21,700
10×100回分 E1960 250,000 175,000
デュアルレポーター検出試薬:長時間発光(半減期2時間)で多検体処理にお勧め
Dual-Glo® Luciferase Assay System 10ml E2920 38,000 26,600
100ml E2940 300,000 210,000

miRNA効果検定用ベクター内部標準ベクター不要、検出にはDual-Luciferase® システムをご使用ください

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
pmirGLO Dual-Luciferase miRNA Target Expression Vector 20µg E1330 73,000 36,500

トランスフェクション試薬

製品名 サイズ カタログ番号 通常価格(¥) 特別価格(¥)
低毒性で難しい細胞にも効果的
ViaFect™ Transfection Reagent 0.75ml E4981 59,000 41,300
2 x 0.75ml E4982 95,000 66,500
実績豊富
FuGENE® HD Transfection Reagent 1ml E2311 63,500 44,450
5×1ml E2312 252,000 176,400
FuGENE® 6 Transfection Reagent 1ml E2691 63,500 44,450
5×1ml E2692 252,000 176,400
デュアルルシフェラーゼアッセイとは

サンプル間のトランスフェクション効率の違いを 標準化 できるため、トランジエントな 発現でレポーターアッセイを行う場合に推奨するアッセイです。
*レポーター遺伝子の安定発現株を用いて実験する場合は
 シングルルシフェラーゼアッセイを 選択します。

アッセイフロー
  • それぞれ異なるルシフェラーゼ(NanoLuc® ルシフェラーゼとluc2ホタルルシフェラーゼなど)を有するテストベクターと内部標準ベクターをコトランスフェクション
  • 各ルシフェラーゼについて発光値を測定
  • テストレポーターの発光値を内部標準レポーターの発光値で割ることでデータを標準化→サンプル間の比較が可能となる
逆も可能
キットの選択

NanoLuc® システム…非常に明るく高感度
これから系を立ち上げる方、細胞数が少ない場合、トランスフェクション効率が低い細胞を使用する場合に

レポーター遺伝子
テストベクター=NanoLuc®
内部標準ベクター=luc2

Dual-Luciferase® システム…実績膨大なロングセラー
luc2で構築したテストベクターを既に持っている方、pmirGLOを使用する方

レポーター遺伝子:
テストベクター=luc2
内部標準ベクター=Rluc(ウミシイタケルシフェラーゼ)



転写制御解析にこのコンビ!

【論文事例】ある因子(IRF7)が遺伝子(USP25)発現の活性化に関与していることを下記手順で確かめた。
  • ノックアウトマウス、ウエスタンブロット、定量PCRでUSP25の発現にIRF7を要することを明らかにした
  • IRF7のノックダウンでUSP25の発現量が下落することを定量PCRで示した
  • USP25プロモーター領域に変異を加え、IRF7応答配列をレポーターアッセイにて同定
  • プロモーターアッセイで同定された配列がIRF7と直接相互作用することをChIPで示した
  • Ren, Y., et al. (2016) J. Biol. Chem. 291, 13206-15.

定量PCRとレポーターアッセイを組み合わせたアプリケーション例

● プロモーター解析 ● miRNAの転写後発現調節 ● 核受容体解析 ● シグナル伝達経路解析

レポーターアッセイ なら

  • 定量PCRで検討した標的遺伝子について、タンパク質レベルでの
    発現評価(mRNA量が増加してもタンパク質レベルはあまり変化
    していない場合がある)
  • プロモーターなど遺伝子発現に関与する重要なエレメントの解析
    が可能
  • miRNAが標的とする3'UTRの研究も可能
  • 迅速、高感度、定量的ハイスループット

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