トランスフェクション試薬 MultiFectam
トランスフェクション試薬 MultiFectam
＜プロメガクラブ対象製品＞
本製品は、プラスミドDNAやsiRNAを様々な哺乳動物由来培養細胞中へ効率的に導入できる試薬です。
この試薬は、ポリアミドアミンデンドロンを極性基とするカチオン性脂質からなり、静電気的相互作用により核酸と複合体を形成します。この複合体はエンドサイトーシスにより細胞内のエンドソームに取り込まれます。
その後、複合体はポリアミンデンドロンにより誘起されるプロトンスポンジ効果とエンドソーム膜との疎水的相互作用により、効率良くエンドソームから細胞質へ放出されるため、高い遺伝子発現効率やノックダウン効果が得られます。
・時間の短縮化：新しい導入機構（プロトンスポンジ効果と膜融合能）
・低毒性：連続したトランスフェクションも可能
・汎用性：プラスミド、siRNAのトランスフェクションに適応
・簡便：操作が簡便で、血清や抗生物質存在下でも導入可能
製品内容・価格表
本製品は凍結乾燥品 6本で構成されます。 標準プロトコルでプラスミドDNA24ウェルプレート20枚分、siRNA 24ウェルプレート18枚分のトランスフェクションが行えます。
MultiFectam 価格表
| サイズ | カタログ番号 | 数量 | 価格(￥) |
|---|---|---|---|
| 1×0.33mg | ETF1000 | 1 | 13,000 |
| 2×0.33mg | ETF2000 | 1 | 24,000 |
| 6×0.33mg | ETF5000 | 1 | 59,000 |
（図１）正常ヒト皮膚繊維芽細胞（NHDF-ad）ルシフェラーゼ活性 画像
（図２）株化細胞（COS7, HeLa-S3, K562）ルシフェラーゼ相対活性（他社Aを1とした場合）画像
（図３）3回のトランスフェクション後7日目の細胞生存率 画像
（図４）Multi-Fectam によるGFPベクターの導入 画像
テストされた細胞： 細胞株 … HeLa-S3, COS7, A549, U2OS, SKOV3, Balb3T3, CHO 浮遊細胞 … K562, Jurkat
保存条件
4℃（-20℃でも保存可能）
安全データ シート（SDS)プロメガ資料
プロトコル
Q&A
Tips
MultiFectamの最適化（２４ウェルの場合）
MultiFectamの最適化（９６ウェルの場合）
プレゼンテーション
その他
実施可能なトランスフェクションサイズ（ETF5000 製品あたり）
| サイズ 240μg相当のDNA | サイズ 9000 pmol相当のsiRNA | |
|---|---|---|
| 96-well | 25枚分 (2400well分) | 23.43枚分 (2250well分) |
| 48-well | 25枚分 (1200well分) | 23.43枚分 (1125well分) |
| 24-well | 20枚分 (480well分) | 18.75枚分 (450well分) |
| 12-well | 20枚分 (240well分) | 18.75枚分 (225well分) |
| 6-well | 16枚分 (96well分) | 15枚分 (90well分) |
| 35 mm | 120枚分 | 112.5枚分 |
| 60 mm | 48枚分 | 45枚分 |
| 100 mm | 24枚分 | N/A |
様々な細胞における実施例
| 初代培養細胞 | 動物種 |
|---|---|
| 皮膚線維芽細胞 (NHDF-ad) | ヒト |
| 海馬細胞 | マウス |
| 脂肪細胞 | ラット |
| 肺細胞 | ハムスター |
| 細胞株 | 由 来 | 動物種 |
|---|---|---|
| 1321N1 | 星状細胞腫細胞 | ヒト |
| 3T3-L1 adipocyte | 脂肪細胞 | マウス |
| A549 | 肺がん細胞 | ヒト |
| Balb3T3 | 線維芽細胞 | マウス |
| C2C12 | 筋芽細胞 | マウス |
| Caco-2 | 大腸がん細胞 | ヒト |
| CHO | 卵巣細胞 | ハムスター |
| COS7 | 腎臓細胞 | サル |
| H460 | 非小細胞肺がん細胞 | ヒト |
| HEK293 | 腎臓細胞 | ヒト |
| HEK293T | 腎臓細胞 | ヒト |
| HeLa | 子宮頸部がん細胞 | ヒト |
| HT1080 | 線維肉腫細胞 | ヒト |
| HT-29 | 大腸上皮細胞 | ヒト |
| Huh7 | 肝がん細胞 | ヒト |
| Jurkat | 急性T 細胞性白血病細胞 （浮遊細胞） | ヒト |
| K562 | 白血病細胞 （浮遊細胞） | ヒト |
| Lu65 | 肺がん細胞 | ヒト |
| MC3T3-E1 | 骨芽細胞様細胞 | マウス |
| MCF-7 | 乳がん細胞 | ヒト |
| MDA-MB-231 | 乳がん細胞 | ヒト |
| MIN6 | 膵ベータ細胞 | マウス |
| MRC-5 | 胎児肺線維芽細胞 | ヒト |
| NIH3T3 | 線維芽細胞 | マウス |
| PC12 | 褐色細胞腫 | ラット |
| Raw264.7 | マクロファージ | マウス |
| SKOV3 | 卵巣がん細胞 | ヒト |
| SW480 | 結腸がん細胞 | ヒト |
| SW620 | 結腸がん細胞 | ヒト |
| U2OS | 骨肉腫細胞 | ヒト |
MultiFectam オンラインプロトコル