RT-PCR 基本情報

Pfu DNA PolymeraseはRT-PCRに使えますか

AMV RTとMMLV RTは共に低い忠実度のDNA polymeraseで、AMVでは17,000塩基に1つ、MMLVでは30,000塩基に1つのエラーが起こり得ます(1、2)。そのため逆転写のときに変異が導入される可能性があります。Pfu DNA Polymeraseが通常RT-PCRに使われないのは、Pfu DNA Polymeraseを使うことで増幅時のエラーは減らすことができますが、逆転写反応の時に導入されたエラーは修正されないためです。(PN71-Q&A)

参考文献:

  1. Roberts, J.D., Bebenek, K. and Kunkel, T.A. (1988) Science 242, 1171.
  2. Roberts, J.D. et al. (1989) Mol. Cell. Biol. 9, 469.

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