ReliaPrep™ RNA Clean-Up and Concentration System
操作ステップ 各試薬添加量 早見表 MembraneBindings Solution 添加 100%イソプロパノー ル添加 カラム結合 カラム洗浄 RNA洗浄1 RNA洗浄2 メンブレン乾燥 溶出 100 50 150 75 200 100 250 125 300 150 RNAサンプル (25-300μL)に 150 300 225 450 300 600 375 750 450 900 ReliaPrepTMRNAClean-ur andConcentrationSystem 21071 10preps,21072 SOpreps,21073 250preps 濃縮・クリーンアップ RNAサンプル MembraneBinding 100%Isopropanol TOTAL (オL) Solution(オL) (オL) (オL) 25 12.5 37.5 75 50 25 75 150 MembraneBindingSolution添加(上記) ボルテックス 5sec 試の調製 100%Isopropanol添加(上記) ミニカラムをCollection Tubeにセット サンプル全量をミニカラムに分注 10,000g(14,000rpm)x30sec. 室温 (チューブ内廃液を捨てる) 200オ1ColumnWashSolution 添加 10,000g(14,000rpm)x15sec. 室温 (チューブ内廃液を捨てる) 玉誓。恐悶り唸悶翌唸ご□室温 300オ1RNAWashSolution 添加 ”.炉 10,000g(14,000rpm) X 15sec.室温 ょ (チューブ内廃液を捨てる) 玉 10,0g(14,0rpm)x60sec.室温 ※ミニカラムを Elution Tubeにセット 36.0ml 7.5ml 1.5ml 15オ1Nuclease-FreeWater (またはTEバッファー) 添加 10,000g(14,000rpm)x30sec. 室温 (最大の回収を得たい場合は、この溶出をもう一度繰り返す。) プロメガ株式会社 日本語Web site:www.promega.jp • Column WashSolutionの調製 カタログ番号 Z1073(250preps) Z1072(SOpreps) Z1071(lOpreps) • RNA WashSolutionの調製 カタログ番号 95%エタノール添加量 Z1073(250preps) 100ml Z1072(SOpreps) 20ml Z1071(lOpreps) 20ml 一 95%エタノール添加量 苓 一 Promega ゚ 希釈 RNAの濃縮と回収 ■ InitialConcentration(ng/オI) 一 Ig50l 48,1 S 60 目“ 320」 8 107 喜o 宝夏 30 0 250l l’O150 10 50 ゚ 52.8 • FinalConcent『atlon (ng/pl) 49.6 49,3 畜 土・ 10 ニ・ 10 • 150 20 30 267.3 268.5 257.1 ReliaPrepTMRNAClean-ur andConcentrationSystem 21071 10preps,21072 SOpreps,21073 250preps 一 MouseLiverRNAVolume(1,1) InitiaCloncentration(ng/1.1) • FinalConcentration(ng/pl) ?1:;Q_,; • 33 300μLの水で希釈した後に 15μ1で溶出 平均回収率は、 74.9% 3 150 20 30 I 25 1R ヽ し9 MouseLive『 RNA Volume(オI) I 91 マウス肝臓 RNA Sμgを 100,150,200または 300μLの水で希釈した後に 15μ1で溶出 平均回収率は、 79.8% ReliaPrepTMRNAClean-UpandConcentrationSystemの製品情報・詳細プロトコールは、 下記WEBサイトをご確認ください。 www.oromega.io/Products/Nucleic-Acid-Extraction/clean-uo-and-concentration/reliaoreo- rnacleanu~ 大切なRNAを守る! ! RNaseフリーの環境を作るポイント 1. RNA作業用専用スペースの確保 2. 使い捨てゴム手袋の着用 3. RNaseフリーのチューブやフィ)区?ーチップの使用 4. ピペットなどの器具や試薬類は“RNA専用”に 5. RNase除去剤の使用 プロメガ株式会社 技術的なお問合せは、テクニカルサポートまで Phone:03-3669-7980 E-mail:prometec.jp@promega.com PLG108 マウス肝臓RNA lμgを100,150,200または