ReliaPrep™ gDNA Tissue Miniprep System 簡易プロトコール（マウス尻尾用）

ReliaPrep™ gDNA Tissue Miniprep System INSTRUCTIONS FOR USE OF PRODUCTS A2050, A2051, A2052 Quick PR OTO COL 技術的なお問合せは： e-mail: prometec@jp.promega.com・Tel: 03-3669-7980・Fax: 03-3669-7982 詳細なプロトコールは、英文マニュアル #TM345 をご覧ください。 Revised 2012/04 簡易プロトコール（マウス尻尾用） 1.マウスの尻尾（0.5-1.2cm）を小さく刻んで、1.5mlのマイクロチューブに入れます。 2. サンプルに100μlのTail Lysis Buffer (TLA) と 20μlのProteinase K (PK)を加えます。 ボルテックス を10秒間行います。 3. チューブのキャップを閉めて、 56°Cで1時間から一晩インキュベートします。. シェーカー付きのインキュベーターがない場合には、30 分に一度くらい撹拌します。 4. 300μl のCell Lysis Buffer (CLD) と 20μl のRNase A Solution を各サンプルに加えます。 ボルテックス 10秒間行い、56°C で 10分間反応させます。 5. ヒートブロック等から取り出し、250μl の Binding Buffer(BBA)を加えます。 ボルテックス を10秒間行います。 組織が残っているような場合には、1分間遠心を行い、上清を次のステップに使用します。 6. ReliaPrep™ Binding Column をCollection tube にセットして、サンプルを加えます。 7. 最高速で1分間遠心します。液がカラムに残っているようであれば、さらに遠心します。 8. Collection tube に残ったフロースルーを廃棄し、カラムを新しいCollection tubeにセットします。 9. 500μl のColumn Wash Solution (CWD) をカラムに加え、最高速で2分間遠心します。 フロースルーを廃棄します。 10.ステップ 9 をさらに2回行います（合計3回のWashを行います）。 11.カラムを、新しい1.5mlのマイクロチューブにセットします。 12. 50–200μl のNuclease-Free Water をカラムに加えて、最高速で1分間遠心します。 13. 溶出したDNAは、短期間の保存の場合は4°C、長期間の保存の場合には–20°Cで保管します。 TLA+PK 56℃ 2 時間