RT-PCR 基本情報

RT-PCRの産物をクローニングするためにどのような方法が使えますか。

プロメガでは、鋳型に依存せずに3’末端に1つのdeoxyadenosine(A)が付加された増幅産物のクローニングにpGEM®-T (Cat.# A3600, A3610) と pGEM®-T Easy (Cat.# A1360, A1380) Vector Systemsを販売しています。これらのベクターはPCR産物とのライゲーションが効率的に行われるように3’末端に1つのTが突出した直鎖状DNA分子です。さらに、プロメガではこれらのキットに添付されるバッファーの組成を改良しました。この新しい2X Rapid Ligation Bufferでは、室温1時間でライゲーション反応を行うことができます( 以前の10× Bufferでは4℃一晩)。この2× Rapid Bufferで得られるコロニー数は、以前の10×Bufferを用いて4℃一晩で得られた数と同等でした。(PN71-Q&A)

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