Ribo m7G Cap Analog

Flexi® Rabbit Reticulocyte Lysate Systemは、cap付加された転写産物やされていない転写産物を用いた最適化に使えますか。

使えます。Flexi® Rabbit Reticulocyte Lysate Systemのライセートには塩やDTTが加えられていません。また、capされていない転写産物やされている転写産物の翻訳を最適化するためにKCl、MgCl2やDTTが添付されています(1)。KClの添加によりcap付加されたmRNAからの開始の忠実度が改良されます(2)。Flexi® Rabbit Reticulocyte Lysate Systemにcap付加された転写産物を加える時に推奨されるKCl濃度は70~100mMです(最終反応液量50μlあたり2.5M KClを1.4~2μl)(1)。(PN74-Q&A)

  1. Flexi® Rabbit Reticulocyte Lysate Systems Technical Manual #TB127, Promega Corporation.
  2. Kozak, M. (1990) Nucl. Acids Res. 18, 2828.

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