Kinase-Glo®

ATP濃度とRLU値の相関性を調べるためにはどうすればよいですか?

rATP (Cat# P1132, 0.5mL, 10mM) を0.001μM~10μMの範囲となるように、ATPase Free のキナーゼbufferで希釈します。このATP溶液50μLとKinase-Glo® 試薬を50μL加えて25℃、10分間反応後、Luciferaseの発光量をルミノメーターで測定してください。図3にATP濃度とRLU値の相関性を示します。

図3 ATP濃度とRLU値の相関性

50μl kinase reaction buffer (40mM Tris [pH 7.5], 20mM MgCl2, 0.1 mg/ml BSA) にrATPを希釈し、Kinase-Glo® 試薬を添加10分後にルミノメーターで測定

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