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GloSensor™ cAMP Assay

プラスミドがpGloSensor™-20FとpGloSensor™-22Fの2種類ありますが、何が違いますか？

20Fと22FはcAMPとの結合親和性が異なります。22FはcAMPとの親和性が20Fより低く、このため室温ではシグナル/バックグラウンド比（S/B比）が大きくなり、また高濃度cAMPでもシグナルが飽和しません（図3）。 このため、22Fは室温でのGsおよびGi共役型受容体のアッセイに推奨します。 一方20Fは室温ではバックグラウンドが高いため、Forskolinを使わないGi共役型受容体アゴニストアッセイに使用できます。また37℃では22Fのシグナルが大幅に低下するため、20Fを推奨します。 詳細は製品マニュアル をご参照ください。

pGloSensor™-20Fと22Fを無細胞発現系で発現させ、各濃度のcAMPと反応させた。22Fはシグナル/バックグラウンド比（パネルA）とEC50（パネルB）がともに高いが、低濃度cAMPでのシグナル増加率（パネルA）は同様に段階的増加を示す。シグナル増加率（パネルA）はcAMPを含まないサンプルに対する相対値で示した。